重组人源化胶原蛋白原材料评价指导原则（五）

下游工艺杂质控制
重组人源化胶原蛋白需重点关注下游工艺杂质控制方法，包括化学处理试剂、重金属元素、溶剂等。根据YYT-1888标准应用范围，需对重金属总量及铜、铁、镍等微量元素设定检测标准，并明确防腐剂、冻干保护剂的限量要求和检测方法。
细菌内毒素与无菌要求
细菌内毒素限量要求需根据产品与人体接触方式制定。若以微生物限度控制状态提供，需按中国药典通则进行微生物技术法和控制菌检查；若以无菌状态提供，则需符合无菌检查法行业标准。
分子变异体分析
分子变异体分离技术需鉴别脱酰胺化、氧化、糖基化等非预期修饰，以及异构化、二硫键错配等问题。采用层析法、质谱法或光谱法进行分离，若变异体功能与目标产物一致，可不视为杂质。需通过稳定性实验降解监测，评估胶原蛋白降解产物是否增加免疫原性风险。
检测方法与功能验证
聚合体（如二聚体、多聚体）可通过分子筛层析法定量，并建立非预期降解物判定标准。对于分子量变化较小的修饰，需结合功能性实验评价方法，验证其对预期功能的影响。相关检测需参照YYT1849重组胶原蛋白指纹图谱分析标准执行。